ACQ (ADN complémentaire) - gènes humains
L'ADNc terme se réfère à l'ADN complémentaire. L'ADNc est connu pour être synthétisé, ou fabriqué à partir d'une matrice d'ARN ou d'ARNm messager. Il est synthétisé dans une réaction qui est catalysée par la transcriptase inverse et l'ADN polymérase enzymes. Essentiel à noter est que l'ADNc est habituellement utilisé pour cloner des gènes eucaryotes dans des procaryotes.
Les scientifiques utilisent généralement l'ADNc quand ils veulent exprimer de certaines protéines dans une cellule qui n'exprime pas normalement une telle protéine. Ce processus est appelé expression hétérologue. L'expression d'une telle protéine se fera par le transfert de l'ADNc codant pour cette protéine de la cellule réceptrice. En outre, essentiel à noter est que l'ADNc peut également être produit par des rétrovirus comme le virus de l'immunodéficience simienne, le VIH-1 et VIH-2 entre autres. Une fois que l'ADNc est créée à partir de ces virus, il est intégré dans le génome de l'hôte, où il continue de créer un provirus.
La recherche montre que lorsqu'une protéine est synthétisée, l'ADN d'un gène est transcrit en un ARNm qui est ensuite traduit en une protéine. Les gènes sont généralement divisés en gènes eucaryotes et procaryotes. La seule différence entre ces gènes est que les gènes eucaryotes contiennent des introns au lieu de extrons qui sont contenues dans les gènes procaryotes.
Dans certains cas, il peut être nécessaire de faire une cellule procaryote exprimer les gènes d'une cellule eucaryote. L'une des façons de rendre cela possible est en ajoutant l'ADN eucaryote directement dans la cellule procaryote, de manière à lui permettre de faire une protéine propre. Comme on l'a noté, l'ADN eucaryote a introns, alors que l'ADN procaryote n'a pas la machine pour enlever introns de l'ARN qui a été transcrit. En conséquence, toutes les séquences d'introns doivent être retirés de l'ADN eucaryote avant qu'il ne soit transféré à la cellule procaryote. De cette façon, la cellule ne sera pas placé à la charge de devoir enlever introns. L'ADN sans intron qui est créé est à la suite de l'ARNm sans introns, ce qui est la raison pour laquelle il est fait référence comme une copie complémentaire de l'ARNm. Il est pour cette raison que l'on appelle un ADN complémentaire ou ADNc.
Bien qu'il existe de nombreux procédés de synthèse d'ADNc, la meilleure façon de le faire est d'utiliser l'ARNm mature ou entièrement épissé. Cela se fait habituellement en utilisant la transcriptase inverse enzymatique. Cette enzyme est utilisé parce qu'il fonctionne essentiellement comme un simple brin d'ARNm. Il génère son ADNc par appariement de paires de bases de l'ARN de leur ADN complémentaire.