L'utilisation des médias sélectif et différentiel
UTILISATION DES MÉDIAS ET DIFFÉRENTIEL SELECTIF
De nombreux types de supports sont utilisés dans le laboratoire de microbiologie. En général, ces médias peuvent être divisés en plusieurs catégories, y compris nutritive, différentielle et sélective.
milieux nutritifs sont définis comme types de supports qui soutiennent la croissance d'une large gamme de micro-organismes. Ces types sont généralement considérés comme non sélectif en raison du fait qu'ils pousseront la plupart des organismes. Des exemples de milieux nutritifs comprennent de soja tryptique agar, la gélose nutritive et la gélose au sang.
types moyens différentiels sont ceux qui distinguent les unes des autres micro-organismes en fonction des caractéristiques de croissance évidentes lorsqu'elles sont cultivées sur des types spécifiques moyennes. Organismes présentant des caractéristiques de croissance présentent généralement des différences visibles dans la croissance lorsqu'ils sont placés sur un support différentiel. Les exemples incluent la gélose au sang, gélose éosine bleu de Méthylène (EMB), Mannitol agar Sel et agar MacConkey.
types de milieu sélectif sont formulés pour soutenir la croissance d'un groupe d'organismes, mais inhibent la croissance d'une autre. Ces milieux contiennent des antimicrobiens, des colorants, ou d'alcool pour inhiber la croissance des organismes non ciblés pour l'étude. types milieu sélectif comprennent la gélose EMB, l'agar Mannitol sel, l'agar MacConkey et Phenylethyl alcool (PEA) agar.
Éosine Méthylène agar bleu (gélose EMB) contient les colorants éosine et le bleu de méthylène. Ils inhibent les organismes Gram-positifs. Un tel milieu est sélectif pour les espèces Gram-négatives. organismes de fermentation tels que le lactose de E. coli produisent un précipité noir sur EMB. Leurs colonies seront noirs ou possèdent des centres sombres avec pourtours transparents, incolores. fermenteurs non-lactose tels que Proteus sp. Salmonella sp. ou Shigella sp. apparaissent rose ou décoloré. Ainsi, le milieu est considéré comme différentiel par rapport à la fermentation du lactose.
MacConkeyagar est similaire à la gélose EMB en ce qu'elle est sélective pour les espèces à Gram négatif et différentiel par rapport à la fermentation du lactose. agar MacConkey est utilisé pour la détection des coliformes et des pathogènes entériques en fonction de leur capacité à fermenter le lactose. bactéries fermenter le lactose apparaissent rouge rose alors que les bactéries fermentant non-lactose apparaissent sous forme de colonies incolores ou transparentes.
agar-agar de sel mannitol (7,5% de NaCl) est un milieu sélectif pour les staphylocoques et différentielle par rapport à la fermentation du mannitol. La croissance de la plupart des bactéries autres que les staphylocoques, qui sont halophile, est inhibée par la forte concentration de sel dans le milieu. La fermentation du mannitol est seulement vu dans les espèces pathogènes de Staphylococcos et est signalée par la production de produits acides conduisant le rouge de phénol dans le milieu pour passer d'un neutre rouge-orangé au jaune vif. staphylocoques non pathogènes produisent de petites colonies entourées par des zones rouges ou violettes Rose- en raison de la production de base par des produits en raison du métabolisme.
Phényléthyle agar alcool (PEA) est un milieu sélectif qui inhibe la croissance de la plupart des organismes Gram négatifs. l'alcool phényléthylique agit pour perturber la structure lipidique dans la membrane des organismes Gram négatif, ainsi que l'inhibition de la synthèse des protéines, conduisant à une faible croissance de ces organismes sur le support. La croissance des organismes à Gram négatif sur ce milieu a tendance à un retard de croissance ou complètement arrêté.
La gélose au sang (5% des plaques de sang de mouton TSA) est un milieu nutritif avec des propriétés différentielles par rapport à l'hémolyse. L'hémolyse est la destruction des globules rouges (hématies). La mesure dans laquelle les globules rouges sont détruits peut être reconnu par les effets des enzymes hémolytiques sur les cellules dans le milieu. ventilation complète des globules rouges est appelé hémolyse bêta (β) et est reconnu par la compensation autour des colonies créant le hémolysine. destruction partielle de la hématies conduit à une couleur brun verdâtre sur la gélose et est appelé hémolyse alpha (α). Gamma hémolyse (γ de) est généralement le terme appliqué à la croissance sur gélose au sang qui ne cause aucun dommage aux globules rouges et aucun changement dans le milieu.
Première partie: les médias sélectif et différentiel
Chaque groupe de table aura besoin des éléments suivants
2 plaques de gélose EMB
2 plaques de gélose MacConkey
2 Mannitol sel plaque de gélose
2 plaques de gélose PEA
Les cultures des organismes suivants seront fournis: