Comment préparer les phases mobiles - Ratios de mélange de solvants Shimadzu (Shimadzu Corporation)

Phase mobile: 50% de solution aqueuse d'éthanol
Comment voulez-vous préparer cette solution?

Des mélanges de solvants sont en général préparés en termes de rapports de volume (v / v) ou des rapports en poids (w / w). Etant donné que le volume d'une solution varie avec la température, la préparation des mélanges de solvants à base de rapports en poids fournit une meilleure reproductibilité, mais cela est plus complexe, il est probablement sûr de supposer mélanges sont normalement préparées sur la base des rapports de volume. Toutefois, dans certains cas particuliers, par exemple lorsque le mélange de solutions très visqueuses telles que des amines, des rapports de volume de poids (p / v) sont parfois utilisés.






De plus, les méthodes de notation peuvent varier considérablement pour les conditions de phase mobile, selon le document de référence, base de données HPLC, ou une autre source.
Il est extrêmement rare de voir les procédures de préparation de la phase mobile écrit en détail, tels que « ajouter 340 ul d'acide phosphorique à 100 ml d'eau. » Au contraire, la notation telle que « solution à 20% d'acétonitrile aqueux » ou « acétonitrile - eau (40/60) » est utilisé. Parfois, les méthodes de notation qui ne totalisent 100%, comme « un mélange acétonitrile / eau = 21/5 » ou « un mélange méthanol / eau / acide phosphorique = 95/5 / 0,3 » sont utilisés.
Bien qu'il n'y ait pas de méthode fixe pour la notation de la composition de phase mobile, la méthode de notation doit permettre la préparation de phases mobiles d'une manière qui permet la reproduction de l'analyse en fonction des conditions données d'analyse, et il doit être possible de comprendre correctement la méthode de notation.

Signification et méthode de préparation de 50% (v / v) Solution aqueuse d'éthanol

Compte tenu de la notation « éthanol / eau = 1/1, » la méthode indiquée dans la procédure 1 ci-dessous est apparemment largement utilisé pour la préparation.
Cependant, le même mode opératoire 1 est souvent utilisée pour préparer les solutions indiquées comme « solution à 50% d'éthanol aqueux. » Mais, selon un dictionnaire de la chimie, la procédure 2 est en fait la méthode de préparation qui utilise des pourcentages de volume correct (voir tableau). Si oui, les rapports de volume indiqués en termes de pour cent et ratios, tels que « 1: 1 », conduisent finalement à une composition différente de la phase mobile. En d'autres termes, la densité des mélanges de solvants est pas simple valeur moyenne des densités des constituants solvants, de sorte que les deux méthodes indiquées ci-dessus résulte de différentes compositions de la phase mobile. Par exemple, à des températures proches de la température ambiante (25 ° C), en mélangeant 50 ml d'eau avec 50 ml d'éthanol ne résulte pas en un volume de 100 ml, mais il se rétrécit légèrement à environ 96 mL. En pratique générale, plus la procédure 1 est plus largement utilisé. Par conséquent, il est recommandé que la notation devrait être en termes d'un rapport tel que « XXX / YYY = 2/3. »

Effets de la température sur le volume de solvant

Comme indiqué plus haut, la densité des solutions est affectée par la température ambiante. Quand une solution de solvant est préparé immédiatement après la prise du solvant à partir du stockage, sa température peut être beaucoup plus basse que la température ambiante du laboratoire et des mélanges impliquant du methanol et de l'eau chaude peut être due à la réaction exothermique. Par conséquent, pour préparer les phases mobiles avec une bonne reproductibilité, il est recommandé que les solvants soient placés dans un bain d'eau froide ou chaude pendant un certain temps avant de l'utiliser, jusqu'à ce qu'ils approchent la température ambiante.

Solvants Utilisation de deux pompes de mélange

méthodes isocratiques, souvent utilisés avec des solvants organiques et de l'eau dans la Chromatographie en phase inverse, impliquent soit l'utilisation de deux pompes pour délivrer deux types de phase mobile dans un système de gradient à haute pression, puis en les mélangeant dans un mélangeur ou un autre système fermé, ou prémélange des composants une bouteille et en utilisant une pompe pour la livraison. Toutefois, notez que ces deux méthodes peuvent donner lieu à des temps de rétention, en raison de l'évolution des volumes après le mélange.
Par conséquent, vérifier à nouveau comment les solvants sont mélangés sur une base quotidienne.

Procédure 1 - Préparation de 1 L de phase mobile (approx.)

1) Mesurer 500 ml d'éthanol en utilisant une éprouvette graduée.
2) Mesurer 500 ml d'eau en utilisant une éprouvette graduée séparée.
3) Placez les deux liquides dans une bouteille et agiter vigoureusement.

Mode opératoire 2 - Préparation de 1 L de phase mobile

1) Placer 500 ml d'éthanol dans un flacon volumétrique de 1 L.
2) Ajouter de l'eau tout en agitant le flacon.
3) Attendre jusqu'à ce que la température revienne à la température ambiante (la température augmente en raison de la réaction exothermique).
4) Compléter avec de l'eau jusqu'à ce que le volume total est de 1 L.

Méthodes d'indication Composition des mélanges