Comment verser des plaques d'agar dans une Pincement - Bitesize Bio
Nous avons déjà couvert comment faire la plaque de gélose parfaite à chaque fois. Cet article est une approche grande, détaillée couvrant les trois étapes de base:
- Faire l'agar-agar
- Verser l'agar-agar
- Sécher la plaque
Ce processus vous donne des plaques d'agar stériles. Mais parfois, vous n'avez pas besoin de plaques complètement stériles. Parfois, l'autoclave est plein et vous avez seulement besoin quelques-uns. Si oui, certains changements peuvent être apportés au protocole.
Voici une liste rapide des façons de verser pour vos besoins de plaque. D'abord, je vais passer en revue la façon de verser des plaques stériles. Alors je vais vous dire ce qu'il faut faire lorsque vous travaillez dans des conditions moins qu'idéales.
Complètement stériles plaques d'agar
- Mesurer votre agar et le bouillon et placer dans un Erlenmeyer propre qui mesure deux fois le volume de l'agar que vous faites. Donc, si vous faites 200 ml, utiliser un flacon de 400 ml.
- Ajoutez votre volume d'eau dans le ballon à l'aide d'un cylindre de deuxième cycle.
- Si vous l'avez, placer une barre d'agitation magnétique dans le ballon.
- Placez une feuille sur le dessus du flacon.
- Placez la bande autoclave sur la feuille.
- Autoclaves pendant 25 minutes.
- Retirez le flacon en utilisant des gants autoclave. Si vous utilisez une barre d'agitation, placer le ballon sur une plaque d'agitation et remuer doucement.
- Préparer une hotte à flux et plaques en utilisant une technique stérile.
- Une fois que le ballon est à la température ambiante, ou à peu près, ajouter des antibiotiques souhaités et de passer à la hotte à flux.
- En utilisant une technique stérile, soulever le couvercle de la plaque supérieure à un angle et versez doucement le volume désiré. Cap la plaque, soulevez-le et placez doucement dans l'arrière gauche de la hotte à flux, créant des rangées de plaques coiffées comme vous allez.
- Laissez les plaques sèches dans la hotte à flux laminaire, puis individuellement fermer chacun avec parafilm ou dans des sacs stériles. Conserver à 4 ° C.
Plaques non autoclaves
Disons que vos pauses d'autoclaves et vous avez besoin des plaques d'agar en un éclair. Après avoir du laboratoire au laboratoire, la mendicité pour les plaques et à venir à court, vous êtes toujours dans une impasse. Au lieu de l'autoclave, vous pouvez mesurer votre masse désirée d'agar, le mettre dans un Erlenmeyer sec, ajoutez votre eau et micro-ondes pendant 2-4 minutes, en fonction du volume. Assurez-vous d'arrêter le micro-ondes de temps en temps pour éviter le débordement.
Une fois que le liquide est clair et entièrement bouillonnement, le sortir du four micro-ondes et versez vos assiettes une fois que la solution est assez cool.
Sera-ce stérile? Non. Si vous avez besoin d'une plaque stérile, si vous le faire? Non.
Plaques autoclavé sur le banc coulé Haut
Disons que vos pauses de la hotte à flux laminaire, ou est complètement plein. Vous avez déjà vos autoclavé médias, il est prêt à verser. Que faire? Dans ces circonstances, vous pouvez verser des plaques sur votre paillasse.
Tout d'abord, nettoyer votre zone en utilisant une technique stérile, comme vous le feriez d'une hotte à flux laminaire. Essuyez le banc avec de l'éthanol. Ouvrez le sac de boîtes de Pétri de manière stérile. J'ouvre au rabat en disant « ouvrir ici, » tourner le sac à l'envers sur le banc, et prendre lentement le sac de la tour de boîtes de Pétri non ouverts. Diviser la tour en deux.
Dans l'intérêt d'essayer d'être comme « stérile » que possible, versez de la place de la plaque inférieure. Pour ce faire, soulever le couvercle de la plaque légèrement la plaque plus basse (puis soulever la tour entière avec elle), versez le volume désiré, puis régler le couvercle vers le bas. Répétez l'opération pour la prochaine plaque plus basse. Lorsque vous avez rempli toutes les assiettes dans la tour, laissez la tour à sécher. Au sein d'une heure, les plaques seront fixées, mais laissent la tour pendant la nuit pour se débarrasser de la plupart de la condensation. Ceux-ci peuvent être stockés dans un sac stérile ou fermées individuellement avec des bandes de Parafilm à 4 ° C.
Est-ce que ces plaques complètement stérile? Non. Si vous avez besoin d'une plaque stérile, si vous le faire? Non.
La façon dont vous allez sur vos assiettes verser est entièrement à vous et à vos besoins! Tout comme il y a plus d'une façon d'éponger un plancher, il y a plus d'une façon de faire toutes les étapes du processus de coulée de la plaque. Pensez à pourquoi vous avez besoin de la plaque, ce que vous avez besoin de faire fonctionnellement, votre situation et aller de là.